引言
三磷酸腺苷(ATP)是细胞内的能量货币,参与信号传导与代谢调控。FITC标记ATP(FITC-ATP)可示踪其合成、分泌及受体结合过程,为神经科学、肿瘤学及代谢疾病研究提供动态监测手段。
1. 标记位点与生物活性
FITC通过ATP的核糖羟基或γ-磷酸基团共价连接,需优化标记比例以避免干扰ATP酶活性。高效液相色谱(HPLC)和生物发光法验证标记物保留对P2受体(如P2X7)的激动作用。
2. 研究应用
· 细胞代谢成像:通过共聚焦显微镜观察FITC-ATP在肿瘤细胞中的摄取,评估能量需求与化疗敏感性关联。
· 神经递质研究:示踪ATP在突触间隙的释放,揭示其在神经元-胶质细胞通讯中的作用。
· 药物筛选:基于FITC-ATP的荧光强度变化,筛选增强ATP合成(如线粒体靶向药物)或抑制其降解(如ecto-ATP酶抑制剂)的候选分子。
3. 技术突破与挑战
突破在于首次实现ATP代谢通路的实时可视化,挑战包括标记可能轻微改变ATP与酶的结合动力学,需通过结构修饰优化。
结论
FITC-ATP为细胞能量代谢研究开辟了新维度,未来可结合超分辨显微镜解析亚细胞器ATP动态,或开发基于ATP的诊疗探针。
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