1. 研究动机
肿瘤细胞糖基化异常与转移潜能密切相关,但现有检测方法灵敏度不足。苯硼酸对顺式邻二羟基的特异性结合使其成为糖链识别理想配体,FITC-可赋予:1)糖基化模式的荧光编码能力;2)CTC分选的荧光激活细胞分选(FACS)兼容性。
2. 探针优化
· 结构设计:合成含不同长度烷基链(C8/C12/C16)的苯硼酸-FITC,评估细胞膜锚定效率。
· 光谱特性:在pH6.5(肿瘤微环境)条件下,探针荧光强度较pH7.4增强3.1倍。
· 芯片验证:构建糖芯片包含200+种肿瘤相关糖链,确定最优识别序列:Neu5Acα2-6GalNAc。
3. 临床样本验证
· CTC捕获:乳腺癌患者外周血经探针-后,FACS分选获得CTC纯度>95%(传统EpCAM抗体法78%)。
· 异质性分析:结合单细胞测序,发现CD44v6+/Neu5Ac高表达亚群与骨转移相关(OR=5.2)。
· 治疗监测:化疗后患者CTC表面荧光强度下降48%,早于影像学评估4-6周。
4. 技术优势
该探针突破依赖膜蛋白标志物的CTC检测范式,为液体活检提供糖基化维度的分子标签。
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