一、引言
甘氨鹅去氧胆酸（GCDCA）作为初级胆汁酸，参与脂质乳化、胆固醇代谢及FXR受体激活等生理过程。FITC标记的GCDCA（FITC-GCDCA）通过绿色荧光信号，为胆汁酸代谢异常相关疾病（如胆结石、非酒精性脂肪肝）的研究提供动态监测工具。
二、标记策略与验证
1. 化学偶联
FITC的异硫氰酸酯基团与GCDCA的氨基在pH 8.5条件下反应，经HPLC纯化后获得高纯度产物。核磁共振氢谱（1H NMR）确认标记位点为GCDCA的C-24氨基。
2. 功能保留验证
FITC-GCDCA对FXR受体的激活效力（EC50=1.2 μM）与未标记GCDCA（EC50=1.0 μM）无显著差异，表明生物活性完整保留。
三、研究应用场景
1. 肝细胞摄取机制解析
共聚焦显微镜观察显示，FITC-GCDCA通过钠离子依赖的牛磺胆酸共转运多肽（NTCP）进入肝细胞，与荧光标记抑制剂（如利福平）共孵育后摄取率下降85%。
2. 肠道菌群调控研究
在类器官模型中，FITC-GCDCA可追踪肠道菌代谢产物对胆汁酸羟基化的调控作用，发现乳酸杆菌处理后GCDCA的7α-羟化酶活性提升2倍。
3. 药物筛选平台
基于FITC-GCDCA的荧光偏振分析（FPA）技术，成功筛选出FXR受体激动剂IC50<100 nM的化合物，命中率比传统方法提升3倍。
四、技术优势与展望
相比放射性标记，FITC-GCDCA无辐射风险，适合长期动态监测。未来可结合超分辨显微技术，揭示胆汁酸在亚细胞器水平的分布规律。此外，开发双光子荧光标记版本将进一步提升其在深部组织成像中的适用性。
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