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异硫氰酸荧光素-半乳糖-N-羟基琥珀酰亚胺酯,FITC-Galacto-NHS:糖基化分子的荧光标记利器

发表时间:2025-03-28

1. 引言

FITC-Galacto-NHS(异硫氰酸荧光素-半乳糖-N-羟基琥珀酰亚胺酯)是一种针对半乳糖基化生物分子的高效荧光标记试剂,通过整合半乳糖的靶向性与FITC的荧光示踪能力,广泛应用于糖生物学研究、药物递送系统开发及病原体检测领域。

2. 分子结构与功能特性

· 半乳糖基团(Galacto)β-半乳糖结构可特异性识别肝细胞表面去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR),实现肝靶向递送。

· NHS活化酯N-羟基琥珀酰亚胺酯基团用于与载体(如蛋白质、纳米粒)表面的氨基(-NH?)发生高效偶联反应。

· FITC荧光团:吸收波长495 nm,发射波长525 nm,提供高灵敏度荧光信号,适用于流式细胞术、共聚焦显微镜成像。

3. 合成与应用场景

· 制备工艺:将半乳糖胺盐酸盐与FITC-NHS在碳酸盐缓冲液(pH 9.0)中反应,经HPLC纯化后获得产物,标记效率可达90%。

· 靶向递送研究:标记脂质体或聚合物纳米粒,通过ASGPR介导的内吞途径实现肝细胞特异性递送。

· 病原体检测:标记半乳糖特异性凝集素(如肝炎病毒表面蛋白),用于病毒感染细胞的荧光成像。

· 糖组学研究:标记代谢标记的糖分子,追踪细胞表面糖基化动态变化。

4. 技术优势与局限性

· 优势NHS酯的高反应活性允许在温和条件下快速标记,FITC荧光稳定且易于检测。

· 局限性:半乳糖配体可能被非靶向细胞(如巨噬细胞)摄取,需通过PEG化或配体密度优化减少非特异性结合。

5. 未来方向

可开发多价半乳糖簇(如三聚体/四聚体)增强靶向效率,或结合其他刺激响应性元件(如pH敏感键)构建智能递送系统。

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