FITC-Con A：糖生物学研究的荧光探针

发表时间：2025-05-06

引言
糖基化修饰是细胞识别与信号传导的关键，FITC-Con A通过结合刀豆蛋白A（Con A）的糖结合特异性与FITC的荧光特性，成为糖生物学研究的核心工具。

材料特性与制备
Con A是一种植物凝集素，可特异性结合α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基。FITC-Con A的制备需将Con A溶解于碳酸盐缓冲液（pH 9.0），与FITC在室温下反应1-2小时，经凝胶过滤纯化后获得。标记度控制在2-8个FITC分子/Con A分子，确保不影响糖结合活性。

应用领域

1. 细胞表面糖蛋白分析：在流式细胞术中，FITC-Con A可区分不同糖基化状态的细胞亚群。例如，在肝癌细胞系HepG2中，荧光强度与细胞表面高甘露糖型N-糖链表达量呈正相关。

2. 组织糖基化图谱构建：通过荧光显微镜观察组织切片，FITC-Con A可标记肝脏、胰腺等器官的糖蛋白分布，为糖尿病、癌症等疾病的糖代谢异常研究提供可视化证据。

3. 病原体检测：在细菌感染模型中，FITC-Con A可特异性结合细菌荚膜多糖，荧光信号强度与细菌载量线性相关，检测灵敏度达103CFU/mL。

技术挑战与突破
非特异性吸附是主要干扰因素。通过预处理细胞表面或引入竞争性糖分子，可显著降低背景信号。此外，开发双色标记策略（如FITC-Con A与Cy5标记的凝集素联用），可实现多糖类型的同步分析。