引言
小麦胚芽凝集素（WGA）是一种能特异性结合N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和唾液酸的凝集素，广泛用于细胞表面糖蛋白的检测。通过FITC荧光标记，形成WGA-FITC，可实现细胞膜糖基化的实时可视化，为疾病诊断和细胞生物学研究提供新工具。
结构与结合特性
WGA-FITC的合成通过共价键连接WGA的氨基与FITC的异硫氰酸基团。WGA对GlcNAcβ1-4GlcNAc（N,N'-二乙酰壳二糖）的高亲和力使其能识别细胞表面的N-连接糖蛋白和糖脂。FITC的荧光信号强度与结合位点数量正相关，适用于定量分析。
在细胞成像中的应用
1. 细胞膜糖基化模式分析：
· WGA-FITC标记的细胞膜显示荧光强度差异，揭示不同细胞类型（如癌细胞与正常细胞）的糖基化水平差异。
2. 细胞动态监测：
· 实时追踪细胞分裂、迁移或凋亡过程中的糖蛋白分布变化。
在糖蛋白分析中的应用
1. 糖蛋白富集与鉴定：
· WGA-FITC结合的糖蛋白可通过荧光激活细胞分选（FACS）或亲和层析纯化，结合质谱分析鉴定糖基化位点。
2. 疾病标志物筛选：
· 癌症患者血清中异常糖基化的蛋白质可通过WGA-FITC捕获，为早期诊断提供依据。
优势与局限性
· 优势：WGA-FITC结合特异性高，荧光信号稳定，适用于活细胞成像。
· 局限性：WGA可能结合非特异性糖链（如唾液酸），需通过对照实验验证结果。
