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ICG-Streptavidin┃渝偲科普┃吲哚菁绿-链霉亲和素/ICG-链霉亲和素/吲哚菁绿标记链霉亲和素

发表时间:2025-12-11

ICG-Streptavidin(吲哚菁绿-链霉亲和素)是一种由近红外荧光染料吲哚菁绿(ICG)与链霉亲和素(Streptavidin)通过共价键偶联形成的复合物。链霉亲和素是从链霉菌中提取的同源四聚体蛋白,每个单体分子量约13 kDa,四聚体总分子量约52-55 kDa,其表面存在四个高亲和力生物素结合位点。ICG是一种小分子有机染料,分子量约818 Da,具有独特的共轭双环结构,其激发波长位于750-780 nm,发射波长在800 nm附近,呈现明亮的近红外荧光。

化学反应机理

ICG与链霉亲和素的偶联通常通过化学交联反应实现。链霉亲和素表面赖氨酸残基的氨基可与ICG的羧基或活性酯基团发生缩合反应,形成稳定的酰胺键。部分制备工艺会引入异双功能交联剂,通过两步反应分别修饰链霉亲和素与ICG,以提高偶联效率。该复合物保留了链霉亲和素对生物素的高特异性结合能力,同时赋予体系近红外荧光特性。

特性分析

高亲和力与特异性:链霉亲和素四聚体结构可同时结合四个生物素分子,结合强度远超传统抗原-抗体反应,且背景干扰极低。

强荧光信号与低背景:ICG的近红外荧光特性使其在生物组织中具有深层穿透能力,可有效避开可见光区自发荧光干扰,显著提升成像信噪比。

生物相容性与稳定性:链霉亲和素作为天然蛋白具有良好的生物相容性,ICG通过共价键偶联后稳定性增强,减少非特异性脱靶效应。

动态光学特性:ICG的吸收光谱会随环境条件(如pH、溶剂极性)发生动态偏移,其蛋白偶联物的吸收峰通常位于750 nm附近,降解产物则呈现850 nm红移特征,可用于追踪代谢过程。

应用领域

生物分子标记与追踪:通过生物素标记靶分子(如抗体、核酸适配体),利用ICG-Streptavidin实现高灵敏度荧光标记,适用于细胞表面受体动态分布研究及亚细胞结构定位。

活体成像与诊断:复合物可穿透生物组织,用于小动物模型血管成像、肿瘤边界识别及淋巴系统可视化,其近红外特性尤其适合深部组织成像。

分子相互作用研究:结合表面等离子共振(SPR)或荧光共振能量转移(FRET)技术,可定量分析生物素化分子与靶标的结合动力学参数。

材料表面功能化:将ICG-Streptavidin修饰于纳米颗粒或生物材料表面,通过生物素-链霉亲和素系统实现靶向分子偶联,提升材料生物识别能力。

结论

ICG-Streptavidin通过整合链霉亲和素的超高亲和力与ICG的近红外荧光优势,为生物成像、分子检测及材料科学提供了高效工具。其模块化设计允许通过生物素化分子实现功能扩展,在动态生物过程追踪、复杂体系分析及靶向载体构建中展现出广阔前景。未来,通过优化偶联策略与光谱调控技术,该复合物有望进一步推动生物医学研究与工程应用的交叉融合。

注意:仅用于科研,不能用于人体实验。

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