中文名称与基本定义
AF405-链霉亲和素（Alexa Fluor 405-Streptavidin）是一种基于链霉亲和素（Streptavidin）与Alexa Fluor 405荧光染料共价偶联形成的生物化学试剂。其核心结构由四聚体链霉亲和素蛋白与蓝色荧光染料AF405通过琥珀酰亚胺酯（NHS ester）化学键连接而成，兼具高特异性结合能力与优异的光学性能，广泛应用于生物医学研究中的分子标记与信号检测。
化学特性与反应活性
链霉亲和素源自链霉菌属细菌，分子呈四聚体结构，每个亚基可独立结合生物素分子，形成自然界中亲和力最强的非共价相互作用之一。其非糖基化修饰与近中性等电点特性显著降低了非特异性结合背景，尤其适用于复杂生物样本的标记。AF405染料分子含磺酸基团与芳香环结构，赋予其高量子产率与光稳定性，激发波长位于紫外-可见光交界区域，可减少细胞自发荧光干扰，且在宽pH范围内保持稳定，兼容多种有机溶剂体系。
合成路线与机制
AF405-链霉亲和素的制备采用活性酯偶联法：首先将重组链霉亲和素溶解于碳酸氢钠缓冲液中，通过透析去除杂质；同时将AF405-NHS酯溶解于无水DMF制备储备液。在温和条件下，按染料与蛋白摩尔比过量添加至蛋白溶液中，室温避光反应数小时，期间持续监测吸收光谱变化以控制标记效率。反应终止后，通过凝胶过滤层析分离未结合的游离染料，收集目标产物并经超滤浓缩至适宜浓度。最终产物需验证纯度与生物活性，确保荧光强度与生物素结合能力符合应用要求。
主要用途与应用场景
荧光标记与成像：作为二级标记试剂，AF405-链霉亲和素可与生物素化抗体或探针结合，通过高亲和力相互作用实现目标分子（如蛋白质、核酸）的定位与定量。其蓝色荧光信号与绿色、红色荧光染料光谱重叠小，适用于多色共聚焦显微镜成像及流式细胞术多通道检测。
信号放大系统：在免疫检测或原位杂交实验中，单个链霉亲和素分子可同时结合多个生物素化分子，通过“桥接”作用显著增强荧光信号，提升低丰度靶标的检测灵敏度。
生物传感器开发：利用其稳定的光学特性与特异性结合能力，可构建基于荧光淬灭或增强原理的生物传感器，用于环境监测或生物分子相互作用研究。
高通量分析平台：在微流控芯片或高通量测序技术中，AF405-链霉亲和素作为通用标记模块，可快速识别生物素化样本，简化实验流程并提高数据可靠性。
该试剂凭借其化学稳定性、光谱优势及模块化设计，已成为现代生物标记技术中不可或缺的工具，为生命科学基础研究与临床诊断提供了高效解决方案。
注意：仅用于科研，不能用于人体实验。
以上内容来自重庆渝偲医药科技有限公司小编分享，期待感兴趣的小伙伴留言交流哟~~
