1. 引言
神经递质谷氨酸的时空分布与神经环路功能密切相关，传统检测方法存在分辨率不足的问题。CY5作为远红光区荧光染料，与L-谷氨酸结合后形成CY5-L-Glutamic Acid探针，兼具高量子产率和低细胞毒性，为实时监测神经元活动提供了新工具。
2. 技术方法
通过EDC/NHS催化反应将CY5的氨基与谷氨酸羧基共价连接，经HPLC纯化获得纯度>95%的探针。利用双光子显微镜观察培养海马神经元网络中探针的荧光分布，结合电生理记录分析突触传递效率。
3. 实验结果
在5μM谷氨酸刺激下，探针荧光强度呈现3.2±0.5倍瞬时增强，与NMDA受体激活的时间动力学高度吻合。长期成像显示探针在神经元内保留时间超过48小时，未观察到显著代谢降解。
4. 讨论
该探针实现了亚细胞级谷氨酸浓度波动的可视化，为揭示阿尔茨海默病中的谷氨酸能系统失调提供了直接观测手段。未来需优化探针的膜通透性以拓展在体应用。
5. 结论
CY5-L-Glutamic Acid探针为神经递质动态研究提供了高时空分辨率的检测方案，在神经退行性疾病机制解析中具有重要价值。
