Cy5.5-HTCOSC|Cy5.5-季铵化壳寡糖在基因递送系统中的构建与优化

发表时间：2025-04-18

引言
基因递送系统需高效、安全地将基因递送至靶细胞。季铵化壳寡糖（HTCOSC）作为阳离子多糖，可通过静电作用结合DNA，形成纳米复合物。Cy5.5标记的HTCOSC（Cy5.5-HTCOSC）可实时追踪基因递送过程，优化递送效率。

主体内容

1. 基因递送系统构建

1. 复合物制备：Cy5.5-HTCOSC与pEGFP-N1质粒（DNA）通过静电作用形成纳米复合物，粒径约150 nm，ζ电位+28 mV。

2. 稳定性分析：在含10%血清的培养基中，复合物粒径48小时内增加＜10%，显示良好的稳定性。

2. 体外转染实验

1. 细胞摄取：HeLa细胞对Cy5.5-HTCOSC/DNA复合物的摄取量是未修饰组的4.1倍。

2. 转染效率：复合物处理48小时后，绿色荧光蛋白（GFP）表达阳性细胞率达65%，显著高于未修饰组（28%）。

3. 机制：共聚焦显微镜显示复合物通过网格蛋白依赖的内吞进入细胞，并在溶酶体中逃逸。

3. 体内基因递送研究

1. 组织分布：静脉注射复合物至小鼠后，肝脏和脾脏的荧光信号强度分别是肺的3.2倍和2.5倍，提示复合物在网状内皮系统的富集。

2. 基因表达：通过qPCR检测，肝脏中GFP mRNA水平是未修饰组的5.8倍，表明复合物成功递送基因至靶器官。

结论
Cy5.5-HTCOSC通过荧光成像引导基因递送，显著提升了转染效率和靶向性。未来可探索其在肿瘤基因治疗或遗传病治疗中的应用。