Cy5.5-CORTICOSTERONE皮质酮：神经内分泌研究中的荧光探针新工具

发表时间：2025-04-18

引言
皮质酮（Corticosterone）作为啮齿类动物的主要糖皮质激素，在应激反应和神经内分泌调控中扮演关键角色。传统检测方法依赖血清学分析或免疫组化，但存在实时性差、空间分辨率低等问题。本研究将Cy5.5荧光染料与皮质酮结合，开发一种新型荧光探针（Cy5.5-CORTICOSTERONE），旨在实现活体动物模型中皮质酮水平的动态监测。

主体内容

1. 探针设计与合成

1. 通过点击化学将Cy5.5的羧酸基团与皮质酮的羟基偶联，合成产物经HPLC纯化后纯度达98%。

2. 光谱分析显示，探针在675 nm激发下发射695 nm荧光，斯托克斯位移20 nm，量子产率0.18。

2. 细胞摄取与分布研究

1. 在肾上腺皮质细胞H295R中，探针呈现时间依赖性摄取，共聚焦显微镜显示其主要定位于细胞质。

2. 与游离皮质酮竞争性结合实验表明，探针保留82%的糖皮质激素受体结合活性。

3. 活体成像应用

1. 通过颅窗模型观察小鼠下丘脑区域，发现束缚应激后探针荧光强度增加2.3倍（p<0.01），与血清皮质酮水平呈正相关（r=0.89）。

2. 结合微型荧光内窥镜，实现清醒动物皮质酮波动的无创监测。

结论
Cy5.5-CORTICOSTERONE探针成功实现神经内分泌系统中皮质酮活动的实时可视化，为应激相关疾病机制研究提供动态分析工具，未来可拓展至人类皮质醇检测。